濕熱滅菌如何保證滅菌的有效和均一性

時(shí)間：2015-12-22 10:33:47

常用的滅菌方法有濕熱滅菌法、干熱滅菌法、氣體滅菌法、輻射滅菌法和過(guò)濾除菌法?？筛鶕?jù)被滅菌物品的特性采用一種或多種方法組合滅菌。只要產(chǎn)品允許，應(yīng)盡可能選用最終滅菌法（即產(chǎn)品分裝至包裝容器后再滅菌）滅菌。若產(chǎn)品不適合采用最終滅菌法，可選用過(guò)濾除菌法或無(wú)菌生產(chǎn)工藝達(dá)到無(wú)菌保證要求，只要可能，應(yīng)對(duì)非最終滅菌的產(chǎn)品作補(bǔ)充性滅菌處理（如流通蒸汽滅菌）。
（一）濕熱滅菌法
本法系指將物品置于滅菌柜內(nèi)利用高壓飽和蒸汽、過(guò)熱水噴淋等手段使微生物菌體中的蛋白質(zhì)、核酸發(fā)生變性而殺滅微生物的方法。該法滅菌能力強(qiáng)，為熱力滅菌中有效、應(yīng)用廣泛的滅菌方法。藥品、容器、培養(yǎng)基、無(wú)菌衣、膠塞以及其他遇高溫和潮濕不發(fā)生變化或損壞的物品，均可用本法滅菌。流通蒸汽不能完全殺滅細(xì)菌孢子，一般可作為不耐熱無(wú)菌產(chǎn)品的輔助滅菌手段。
濕熱滅菌條件通常采用121℃*15min、121℃*15min或116℃*40min的程序，也可采用其他溫度和時(shí)間參數(shù)?？傊?，必須保證對(duì)熱穩(wěn)定的物品，可采用過(guò)度殺滅法，其SAL應(yīng)<=10（-12）。熱穩(wěn)定性較差產(chǎn)品的標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間F。［指當(dāng)滅菌溫度為121℃，生物指示菌的耐熱參數(shù)D值為1min，滅菌溫度系數(shù)Z值為10.0℃時(shí)的標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間（121℃下計(jì)算的微生物等效滅活率）］一般不低于8min，如產(chǎn)品的熱穩(wěn)定性很差時(shí)，可允許濕熱滅菌的F。低于8min，此情況下，應(yīng)在生產(chǎn)全過(guò)程中，對(duì)產(chǎn)品中污染的微生物嚴(yán)加監(jiān)控，并采取各種措施降低微生物污染水平，確保被滅菌產(chǎn)品達(dá)到無(wú)菌保證要求。
采用濕熱滅菌時(shí)，被滅菌物品應(yīng)有適當(dāng)?shù)陌b和裝載方式，不能排列過(guò)密，以保證滅菌的有效性和均一性。
濕熱滅菌工藝驗(yàn)證時(shí)，應(yīng)進(jìn)行熱分布試驗(yàn)、熱穿透試驗(yàn)和生物指示劑驗(yàn)證試驗(yàn)。以確定滅菌柜空載及不同裝載時(shí)腔室中的熱分布狀況及可能存在的冷點(diǎn)；在空載條件下，確認(rèn)121℃時(shí)腔室各點(diǎn)的溫度差值應(yīng)<1℃；使用插入實(shí)際物品或模擬物品內(nèi)的溫度探頭，確認(rèn)滅菌柜在不同裝載時(shí)，最冷點(diǎn)物品的標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間（F。）達(dá)到設(shè)定的標(biāo)準(zhǔn)；用生物指示劑進(jìn)一步確認(rèn)在不同裝載時(shí)冷點(diǎn)處的滅菌物品達(dá)到無(wú)菌保證水平。本法常用的生物指示劑為嗜熱脂肪芽孢桿菌孢子。
1、熱分布試驗(yàn)的操作：空載狀態(tài)下的熱分布試驗(yàn)：
①整個(gè)滅菌腔室內(nèi)的溫度探頭應(yīng)均勻分布，將水平和垂直區(qū)均覆蓋在內(nèi)；
②說(shuō)明溫度探頭在腔室內(nèi)的數(shù)量及位置，并有圖示；
③在排水口處，在靠近設(shè)備本身的溫度傳感/控制器的位置，應(yīng)再放置一支探頭；
④在滅菌溫度穩(wěn)定期，各處溫度應(yīng)基本保持一致（如各點(diǎn)之間的溫度差在1℃范圍內(nèi)）；
⑤重復(fù)試驗(yàn)至少3次，以證明在該工藝條件下的溫度均一性、重現(xiàn)性、并且與規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)相符；
⑥每種裝載方式下的熱分布試驗(yàn)；
⑦在產(chǎn)品容器內(nèi)以及腔室均勻放置測(cè)溫探頭以確定在裝載狀態(tài)下升溫緩慢的位置。此試驗(yàn)應(yīng)在最大和最小裝載方式下分別進(jìn)行。
測(cè)定不同裝載方式對(duì)產(chǎn)品的熱力學(xué)效果的影響，通過(guò)實(shí)驗(yàn)應(yīng)得到以下參數(shù)：
①保溫階段的最高和最低溫度（溫度范圍）及平均溫度；②最小和最大F。值；③保溫時(shí)間。復(fù)試驗(yàn)裝載3次，以證明在該工藝條件下的溫度均一性、重現(xiàn)性、并且與規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)相符。
2、熱穿透試驗(yàn)：通過(guò)在產(chǎn)品容器內(nèi)均勻分布測(cè)溫探頭以確定在滅菌時(shí)相應(yīng)裝載方式下的冷點(diǎn)。應(yīng)分別在最大和最小裝載方式下進(jìn)行此試驗(yàn)，以確定不同裝載方式對(duì)被滅菌物品的熱力學(xué)效果的影響，通過(guò)實(shí)驗(yàn)應(yīng)能獲得如下數(shù)據(jù)：各點(diǎn)間的最大和最低溫度（溫度范圍）保溫階段各點(diǎn)的平均溫度、各點(diǎn)的最小及最大F。值、以及各點(diǎn)的保溫時(shí)間。
通過(guò)熱穿透試驗(yàn)應(yīng)達(dá)到以下目的：①測(cè)試數(shù)據(jù)應(yīng)證明，在滅菌保溫階段整個(gè)腔室內(nèi)各容器內(nèi)的溫度應(yīng)不超過(guò)士1℃，各容器內(nèi)溫度之間的最大溫差應(yīng)不超過(guò)2℃；②根據(jù)滅菌參數(shù)確定合適的產(chǎn)品滅菌程序；③至少連續(xù)運(yùn)行3次，以確保設(shè)定滅菌程序的穩(wěn)定性和可靠性。
對(duì)于腸外用大輸液產(chǎn)品及高黏性的液體產(chǎn)品，必須對(duì)容器內(nèi)的冷點(diǎn)進(jìn)行測(cè)試。可在容器內(nèi)布置2&mdash;3個(gè)溫度探頭（插在不同的深度位置）來(lái)獲得此方面的數(shù)據(jù)，對(duì)旋轉(zhuǎn)滅菌器可以不用考慮容器內(nèi)的冷點(diǎn)。
用相同的方法對(duì)于干熱滅菌設(shè)備進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)，但在保溫期間各點(diǎn)間的溫度差較濕熱的要大，如在強(qiáng)制對(duì)流式或隧道式干熱滅菌條件下，各點(diǎn)間溫差會(huì)達(dá)到士15℃。另外，與濕熱滅菌相比，干熱滅菌設(shè)備內(nèi)不同類別的裝載物及其裝載方式，對(duì)熱穿透效果的影響要大得多。