干熱滅菌法一、通過使用干熱空氣殺滅微生物的方法叫干熱滅菌。一般是把待滅菌的物品包裝就緒后,
放入電烘箱中烘烤,即加熱至160~170℃維持1~2h。二、干熱滅菌法常用于空玻璃器皿、金屬器具的滅菌。凡帶有膠皮的物品,液體及固體培養(yǎng)基等都不能用此法滅菌。三、滅菌方法:
1、玻璃器皿等在滅菌前必須經(jīng)正確包裹和加塞,以保證玻璃器皿于滅菌后不被外界雜菌所污染。常用玻璃器皿的包扎和加塞方法如下:平皿用紙包扎或裝在金屬平皿筒內(nèi);三角瓶在棉塞與瓶口外再包以厚紙,用棉繩以活結(jié)扎緊,以防滅菌后瓶口被外部雜菌所污染;吸管以拉直的曲別針一端放在棉花的中心,輕輕捅入管口,松緊必須適中,管口外露的棉花纖維統(tǒng)一通過火焰燒去,滅菌時將吸管裝入金屬管筒內(nèi)進行滅菌,也可用紙條斜著從吸管尖端包起,逐步向上卷,頭端的紙卷捏扁并擰幾下,再將包好的吸管集中滅菌。
2、干燥箱滅菌
將包扎好的物品放入干燥烘箱內(nèi),注意不要擺放太密,以免妨礙空氣流通;不得使器皿與烘箱的內(nèi)層底板直接接觸。將烘箱的溫度升至160~170℃并恒溫1~2h,注意勿使溫度過高,超過170℃,器皿外包裹的紙張、棉花會被烤焦燃燒。如果是為了烤干玻璃器皿,溫度為120℃持續(xù)30分鐘即可。溫度降至60~70℃時方可打開箱門,取出物品,否則玻璃器皿會因驟冷而爆裂。用此法滅菌時,絕不能用油、蠟紙包扎物品。
3、火焰滅菌
直接用火焰灼燒滅菌,迅速徹底。對于接種環(huán),接種針或其它金屬用具,可直接在酒精燈火焰上燒至紅熱進行滅菌。此外,在接種過程中,試管或三角瓶口,也采用通過火焰而達(dá)到滅菌的目的。
濕熱滅菌
一、 煮沸消毒法注射器和解剖器械等均可采用此法。先將注射器等用紗布包好,然后放進煮沸消毒器
內(nèi)加水煮沸。對于細(xì)菌的營養(yǎng)體煮沸約15~30min,對于芽孢則需煮沸約1~2h。
二、高壓蒸汽滅菌法高壓蒸汽滅菌用途廣,效率高,是微生物學(xué)實驗中最常用的滅菌方法。這種滅菌方法
是基于水的沸點隨著蒸汽壓力的升高而升高的原理設(shè)計的。當(dāng)蒸汽壓力達(dá)到1.05kg/cm2時,
水蒸氣的溫度升高到121℃,經(jīng)15~30min,可全部殺死鍋內(nèi)物品上的各種微生物和它們的
孢子或芽孢。一般培養(yǎng)基、玻璃器皿以及傳染性標(biāo)本和工作服等都可應(yīng)用此法滅菌。
操作方法和注意事項如下:
(1)加水:打開滅菌鍋蓋,向鍋內(nèi)加水到水位線。立式消毒鍋最好用已煮開過的水,以便減少水垢在鍋內(nèi)的積存。注意水要加夠,防止滅菌過程中干鍋。
(2)裝料、加蓋:滅菌材料放好后,關(guān)閉滅菌器蓋,采用對角式均勻擰緊鍋蓋上的螺旋,使蒸汽鍋密閉,勿使漏氣。
(3) 排氣 :打開排氣口(也叫放氣閥)。用電爐加熱,待水煮沸后,水蒸氣和空氣一起從排氣孔排出,當(dāng)有大量蒸汽排出時,維持5min,使鍋內(nèi)冷空氣完全排凈。
(4)升壓、保壓和降壓當(dāng)鍋內(nèi)冷空氣排凈時,即可關(guān)閉排氣閥,壓力開始上升。當(dāng)壓力上升至所需壓力時,控制電壓以維持恒溫,并開始計算滅菌時間,待時間達(dá)到要求(一般培養(yǎng)基和器皿滅菌控制在121℃,20min)后,停止加熱,待壓力降至接近"0"時,打開放氣閥。注意不能過早過急地排氣,否則會由于瓶內(nèi)壓力下降的速度比鍋內(nèi)慢而造成瓶內(nèi)液體沖出容器之外。
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